La formación de células sanguíneas depende de una población de células hematopoyéticas indiferenciadas y metabólicamente quiescentes localizadas en la médula ósea, comúnmente llamadas células madre hematopoyéticas. Residen en la fase G0 del ciclo celular, y tienen capacidad de autorrenovación y de diferenciación hacia progenitores de todos los linajes hematopoyéticos.
La mayor parte de estas células expresa el antígeno de superficie CD34, una glicoproteína de transmembrana altamente glicosilada cuya expresión va disminuyendo conforme se diferencian en progenitores más comprometidos hacia determinada línea celular (1).
Mediante la utilización de anticuerpos monoclonales se ha podido saber que las células CD34+ representan una población escasa y heterogénea de precursores que comprenden entre 1 y 3% de las células de la médula ósea y menos del 0,1% de las células mononucleadas de sangre periférica (2).
Actualmente, el trasplante de células precursoras hematopoyéticas es una opción de terapia para sustituir la hematopoyesis del paciente por ser ésta defectuosa, insuficiente o neoplásica; y para permitir la recuperación de la hematopoyesis de un paciente que ha sido sometido a un tratamiento antineoplásico que origina mielosupresión prolongada o definitiva.
Las fuentes de células madre hematopoyéticas son: médula ósea y cordón umbilical.
Los precursores presentes en médula ósea pueden ser obtenidos por punción directa del hueso, o bien, se puede administrar un fármaco que estimule su liberación al torrente sanguíneo y colectarlas por aféresis.
Por otra parte, la sangre de cordón umbilical constituye una de las mejores alternativas terapéuticas ya que se obtienen células que, a diferencia de las de médula ósea, producen una progenie hematopoyética sin disminuir su número. Además, estas células son tan inmaduras que aún no tienen todos los antígenos leucocitarios del individuo nacido por lo que se disminuye la frecuencia y severidad de su rechazo por el hospedero.
Conocer el recuento absoluto de células CD34+ en las distintas fuentes resulta de suma utilidad ya que se considera que un injerto es adecuado para trasplante cuando contiene de 2 a 5 millones de células CD34+ por kg de peso del receptor, o más (3).
Por su alta sensibilidad y reproducibilidad, la Citometría de Flujo es el método de elección para realizar el recuento de células CD34+. Permite decidir el momento óptimo para la aféresis, conocer la viabilidad de la células en cordón umbilical y médula ósea, y elegir la unidad de cordón umbilical más adecuada.
En el año 1995 la Sociedad Internacional de Hemoterapia e Ingeniería en Injertos (ISHAGE por sus siglas en inglés) estableció guías para el recuento absoluto de progenitores CD34+ por Citometría de Flujo en sangre periférica y productos de aféresis (4). En ellas se recomienda una primera selección de células basada en el antígeno panleucocitario CD45, y estrategias para la marcación de células y su posterior adquisición en el citómetro de flujo.
Prestación disponible en Cibic:
Para conocer las condiciones del paciente, de almacenamiento y de envío de la muestra y otros datos sobre las prácticas consulte al manual de prestaciones y a la extranet.
Referencias:
1- Claudia, M – Hematopoietic stem cells, overview and pathways implied on their self-renewal mechanisms – Rev. Cienc. Bogotá (Colombia) 5 (1): 67-89, abril-junio de 2007
2- Bender J- Identification and Comparison of CD34-Positive Cells and Their Subpopulations from Normal Peripheral Blood and Bone Marrow Using Multicolor Flow Cytometry. Blood, Vol 77, No 12 (June 15). 1991: pp 2591-2596
3- Combarías, J.F – Recuento de células CD34+ en sangre periférica como predictor de adecuada recolección de progenitores hematopoyéticos para trasplante autólogo – IATREIA Vol 29(4): 424-432 octubre-diciembre 2016
4- Keeney M – Single Platform Flow Cytometric Absolute CD34+ Cell Counts Based on the ISHAGE Guidelines – Cytometry (Communications in Clinical Cytometry) 34:61–70 (1998)
Para mayor información o consultas:
Sección: Citometría de flujo.
Bioq. M. Victoria Schoepf.
Teléfono: 0341-4499444 interno: 259